一、Vision色譜柱在線速度相同的情況下,管徑越大需要的流速越大,消耗溶劑越多。
F1/D1²=F2/D2²
使用小管徑色譜柱可以節約溶劑。
由公式F=(3πD²u)/20 得消耗溶劑只差F1-F2=(D1²-D2²)3π u/20
例如:當線速度u=0.1cm/s時,使用管徑D=2.1mm.的色譜柱比使用D=4.6mm的色譜柱,節約溶劑79%。
所以,方法優化時使用小管徑色譜柱既有利于節約溶劑和減小載樣量。
二、不同柱徑色譜柱流動相的*流速
對于不同粒徑的色譜柱,特別是大粒徑色譜柱(粒徑大于3um)線速度u=0.1cm/s時,對應的流動相的流速F為*流速。
根據公式 U=(20F)/(3πD²)
式中:線速度u:cm/s,流速F:ml/min,色譜柱柱徑D:mm。
色譜柱柱徑D=4.6 mm的柱子,當線速度u=0.1 cm/s時,*流速F=1ml/min
色譜柱柱徑D=4.0mm的柱子。當線速度u=0.1cm/s時。*流速F≈0.8ml/ming
三、Vision色譜柱線速度相同,分析時間與柱長成正比
u=L/t 式中:u——線速度,L——柱長,t——分析時間,
A:線速度U相同【流速F相同,管徑D相同】,柱效N不同【柱長L不同,粒徑d不同】,洗脫液,柱溫,進樣量相同
結論:分析時間t不同,分離度R不同,分析時間t與柱長L成正比。
B:線速度U相同【流速F不同,管徑D不同】,柱效N相同【柱長L相同,粒徑d相同】,洗脫液,柱溫相同。
結論:分析時間t相同,分離度R相同,進樣量與柱容量成正比。
C:柱容量公式:V=π *r²*L*60%
式中:r——柱半徑cm,L——柱長cm,60%——柱空穴率。
四、Vision色譜柱如何比較柱效
式中:N——柱效,L——色譜柱長,
——粒徑
對于同種填料不同管徑粒徑的色譜柱,柱效N與柱長L成正比,與粒徑成反比,柱長L與粒徑之比相同的色譜柱柱效N相同,在方法優化的時候小粒徑短柱和比值相同的大粒徑長柱有著同樣的柱效。
五、Vision色譜柱柱前壓
減小粒徑和柱徑,減小擴散增加柱效,同時減小流速和柱長,降低柱壓,以便于適應色譜系統,由于色譜柱管徑的縮小,粒徑的減小也會對系統帶來不利的影響,在分析允許的條件下,升高柱溫,降低流動相的粘度,以緩解系統壓力,提高流動相的流量,縮短分析時間。
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