液相色譜所用基本概念:保留值、塔板數(shù)、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。液相色譜所用基本理論:塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致,但由于在氣相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動相,而液體和氣體的性質(zhì)不相同。
此外,液相色譜所用的儀器設(shè)備和操作條件也與氣相色譜不同,所以,液相色譜與氣相色譜有一定的差別。主要有以下幾個方面
①操作條件及應用范圍不同
對于氣相色譜,是加溫操作。僅能分析在操作溫度下能汽化而不分解的物質(zhì),對高沸點化合物、非揮發(fā)性物質(zhì)、熱不穩(wěn)定化合物、離子型化合物及高聚物的分離、分析較為困難,致使其應用受到一定程度的限制,據(jù)統(tǒng)計只有大約20%的機物能用氣相色譜分析。
而液相色譜是常溫操作,不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制,它非常適合相對分子量較大,難汽化,不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì)、離子型化合物和高聚物的分離分析,大約占有機物的70%~80%。
②液相色譜能完成難度較高的分離工作
a.氣相色譜的流動相載氣是色譜惰性的,基本不參與分配平衡過程,與樣品分子無親和作用,樣品分子主要與固定相相互作用。而在液相色譜中流動相液體也與固定相爭奪樣品分子,為提高選擇性增加了一個因素。也可選擇不同比例的兩種或兩種以上的液體做流動相,增加分離的選擇性。
b.液相色譜固定相類型多,如離子交換色譜和排阻色譜等,作為分析時,選擇余地大;而氣相色譜并不可能。
c.液相色譜通常在室溫下操作,較低的溫度,一般有利于色譜分離條件的選擇。
③由于液體的擴散性比氣體的小105倍,因此,溶質(zhì)在液相中的傳質(zhì)速率慢,柱外效應就顯得特別重要;而在氣相色譜中,由色譜柱外區(qū)域引起的擴張可以忽略不計。
④液相色譜中,制備樣品簡單,回收樣品也比較容易,而且回收是定量的,適合于大量制備,但液相色譜尚缺乏通用的檢測器,一起比較復雜,價格昂貴。在實際應用中,這兩種技術(shù)是相互補充的。
綜上所述,液相色譜具有柱效高,選擇性高,靈敏性高,分析速度快,重復性好,應用范圍廣等優(yōu)點,該法已成為現(xiàn)代分析技術(shù)的主要手段之一。目前在化學,化工,醫(yī)藥,生化,環(huán)保,農(nóng)業(yè)等科學領(lǐng)域獲得廣泛的應用。